Arbeitskonzentrationen

(Mark. Primer, Sonde, reverser Primer)

Lyophilisierte Produkte:

Vor dem Öffnen des Gefäßes kurz anzentrifugieren. Das Pellet könnte im Deckel hängen.

Hybridisierungsproben für die LightCycler® Geräte

Der Versand der Hybridisierungsproben erfolgt lyophilisiert in festen Stoffmengen von 300 pmol, 1 nmol, 3 nmol, 6 nmol, 15 nmol, 30 nmol oder 100 nmol.

Lyophilisat nicht einfrieren. Vor Licht schützen und dunkel lagern.

Verwendung mit den LightCycler® Instrumenten

Interne Markierung: Intern markierter Primer, reverser Primer und 3'-markierte Sonde auf dem Gegenstrang.
Mit einem intern mit LightCycler® Red markiertem Primer und einer Fluorescein-Sonde wird ein Überschuß des markierten Primers eingesetzt, damit die PCR asymmetrisch läuft und genügend Target für die Hybridisierungssonde zur Verfügung steht:

Asymmetrisch (interne Markierung)

Konzentration im Ansatz

Stoffmenge für Mastermix

 

je Reaktion

Vol. je
Reaktion

 

 

32 Ansätze 640 µl

10 Ansätze 200 µl

1 Ansätze 20 µl

Vol. je Rkt./ Stammlösung

Primer iLC

0,50 µM

320 pmol

100pmol

10 pmol

1 µl/10 µM

Probe 3FL

0,10 µM

64 pmol

20 pmol

2 pmol

1 µl/3 µM

2. Primer

0,20 µM

128 pmol

40 pmol

4 pmol

0,4µl/10µM